細胞培養中的常用試劑

細胞培養中的常用試劑

動物細胞或組織離開體內到體外進行培養時，需要為其提供生長所需的各種營養物質以及為了讓細胞在體外能夠更好的生長所需要的各種試劑。本期就簡單向大家介紹一下細胞在培養過程中所用到的一些試劑成分以及它們的作用。

01 細胞培養基成分

(1).基礎培養基  

常見的基礎培養基主要有MEM，DMEM，RPMI，主要提供包含葡萄糖、氨基酸、水、微量元素，碳酸氫鈉等的緩沖體系。

● 谷氨酰胺    

是細胞生長所必須的必需氨基酸，參與蛋白質合成和核酸代謝。

● 酚紅指示劑

一種常用的酸堿指示劑，在酸性時顯黃色，中性時顯紅色，堿性時為紫色，酚紅在培養基中作為PH值的指示劑。

● 碳酸鹽/PH緩沖系統

一種生理PH緩沖系統，由于細胞代謝過程中產酸，培養基中的HCO3-會逐漸被消耗掉，所以需及時補充CO2才能維持PH維持在一定范圍內。

(2).動物血清

在基礎培養基中加入2%-20%血清成為完全培養基，血清不僅可以為細胞提供生長所需的基本營養物質，還含有生長因子、激素、微量元素和離子等參與細胞代謝的重要成分。

(3).抗生素

為了防止細胞在培養過程被污染，通常會向完全培養基中添加青霉素-鏈霉素混合液，即雙抗，青霉素主要對革蘭氏陽性菌有效，鏈霉素對許多革蘭氏陰性菌有效。

02 胰蛋白酶-EDTA

胰蛋白酶可使細胞間的蛋白質水解進而細胞離散開，EDTA是一種化學螯合劑，毒性小，對貼壁細胞有離散作用，兩者聯合使用，分散細胞的效力更高，這一步被稱為消化細胞。對于不同細胞而言，對于胰酶使用時的溫度、時間、濃度都有不同的要求，消化不足，細胞不能被消化下來，消化過度會造成細胞損傷。因培養基中的血清可以降低胰酶的活性，通常使用完全培養基來終止細胞消化。

03 PBS緩沖液

PBS是磷酸緩沖鹽溶液，具有鹽平衡、可調整的適宜PH緩沖作用，一般用來清洗細胞，可維持細胞滲透壓。

04 二甲基亞砜(DMSO)

一種重要的滲透型細胞保護劑，是細胞凍存液中的重要成分。細胞在凍存過程中，DMSO能快速穿透細胞膜進入細胞內，降低冰點、延緩凍存過程、提高細胞內離子濃度，減少細胞內冰晶的形成，可減少細胞損傷。

05 支原體抑制劑

支原體污染在細胞培養過程中常見的一種污染源，然而在污染初期可以使用支原體抑制劑來消除細胞液中的支原體，使實驗可以繼續進行下去。

06 臺盼藍染料

一種檢測細胞膜完整性常用的生物染色試劑。死細胞由于細胞膜的完整性喪失，通透性增加，細胞可被臺盼藍染成藍色，而活細胞因為有完整地細胞膜，能夠排斥臺盼藍進入細胞內，因此不會被染色。在顯微鏡下通過細胞顏色可以辨別活死細胞，方便活細胞計數。

捷美JIMEI

細胞培養不僅需要上述的這些試劑，還需要適宜的生長環境（溫度、濕度、CO2濃度），我們一直致力于細胞培養設備的研發，工藝成熟、設備參數穩定，歡迎咨詢！

（發布于：2022-08-08）